|
|
یافته های نوین در علوم زیستی، جلد ۳، شماره ۳، صفحات ۲۳۸-۲۴۸
|
|
|
| عنوان فارسی |
طراحی، ساخت و تأیید مولکولی سازۀ جفتی بیان کنندۀ ژن MaSp۱ و بیان گذرای آن در الیاف پنبه |
|
| چکیده فارسی مقاله |
پنبه L.) Gossypium hirsutum) از محصولات مهم زراعی دنیا است و افزایش کیفیت الیاف آن از اهمیت فراوانی در صنایع نساجی برخوردار است. رشته های تار عنکبوت محکمترین و کشسانترین الیاف شناخته شده در طبیعت است. بدین جهت سازهای طراحی شد تا با بیان ویژه پروتئین تار عنکبوت در الیاف پنبه منجر به افزایش کیفیت آن جهت ریسندگی شود. پس از سنتز سازۀ موردنظر که ترکیبی از پروموتر ویژۀ بیان در فیبر پنبهRD22-like1 ، توالی کوزاک مانند در گیاهان و توالی مصنوعی براساس ژن Lh Major ampullate Spidroin1 (MaSp1) بود، پلاسمید مورد نظر توسط دو آنزیم EcoRI و NheI برش دوگانه داده شد و پس از استخراج قطعۀ موردنظر بین جایگاه های برش EcoRI و NheI دروکتور باینری pCAMBIA1304 همسانه سازی شد. پس از تراریختی E.coli DH5 α توسط این پلاسمید و استخراج آن، پلاسمید جدید pCSP نامگذاری شد. با واکنش زنجیرهای پلیمراز توسط پرایمر اختصاصی ژن مورد نظر و ژن مقاومت به هیگرومایسین و همچنین برش آنزیمی دوگانه صحت واکنش اتصال به تأیید رسید. پس از تراریختیAgrobacterium tumefaciens LBA4404 توسط pCSP، صحت تراریختی با واکنش زنجیرهای پلیمراز تأیید شد. سپس تخمک پنبه رقم ورامین توسط آن ترایخته شد و با اثبات بیان ژن MaSp1 در تخمک و الیاف پنبه در محیط در شیشه مشخص شد پروموتر GaRDL1 که متعلق به گونۀ دیگری از پنبه است بهخوبی توان کنترل بیان ژن مورد نظر در الیاف پنبه را دارد و توالی ژن سنتزی بدون بهینهسازی کدون در الیاف پنبه قابل بیان میباشد. |
|
| کلیدواژه‌های فارسی مقاله |
اسپایدرویین، تخمک، تراریختی، برش دوگانه، پروموتر |
|
| عنوان انگلیسی |
Designing and cloning a MaSp1-based synthetic gene in binary vector for transient expression in cotton fiber |
|
| چکیده انگلیسی مقاله |
Cotton (Gossypium hirsutum L.) is an important crop in the world and increasing its fiber quality is very cr-ucial for textile industries. Spider silk is the strongest and most elastic fiber ever known in the nature. Cotton is one of the main crops in the world and increasing its fiber quality is very important for textile industries. In this regard, a synt-hetic construct has been designed to offer spider silk quality to cotton fibers by fiber-specific expression of Major am-pullate spidroin1 (MaSp1) gene under control of core sequence of GaRD22-like1 promoter. The synthetic construct was double digested by the EcoRI and NheI and sub-cloned in pCAMBIA1304 binary vector. E.coli DH5α was transformed using new plasmid namely pCSP. Ligation and intact backbone of plasmid was conformed using MaSp1 and hygrom-ycin re-sistance genes specific primers and finally with EcoRI/NheI double digestion. Agrobacterium tumefaciens LBA4404 was transformed with pCSP to transform cotton ovules of Varamin cultivar. The expression of MaSp1 in co-tton ovules and fibers showed that this synthetic sequence had been successfully expressed under control of GaRDL1 core promoter and this construct without codon optimization could be used for cotton transformation and its fiber qual-ity manipulation. |
|
| کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله |
spidroin, ovule, transformation, double digestion, promote |
|
| نویسندگان مقاله |
مریم بهنام | maryam behnam
سیدجواد داورپناه | seyed javad davarpanah
رامین کریمیان | ramin karimian
|
|
| نشانی اینترنتی |
http://nbr.khu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-81-22&slc_lang=fa&sid=fa |
| فایل مقاله |
فایلی برای مقاله ذخیره نشده است |
| کد مقاله (doi) |
|
| زبان مقاله منتشر شده |
fa |
| موضوعات مقاله منتشر شده |
علوم سلولی و مولکولی |
| نوع مقاله منتشر شده |
مقاله پژوهشی |
|
|
|
برگشت به:
صفحه اول پایگاه |
نسخه مرتبط |
نشریه مرتبط |
فهرست نشریات
|
